除了基因工程之外,大肠杆菌作为模式生物在细菌生理及行为的研究上也有着不可代替的作用。实验室中至常用到的是大肠杆菌的K12品系,在1997年的时候,科学家们就已经完成了对K12品系的全基因组测序。这一品系与正常的野生型大肠杆菌品系相比,已经失去了在肠道中生存的能力,但是却十分适合进行实验室研究及实验室环境繁殖。至经典的是美国科学家JoshuaLederberg和EdwardTatum利用大肠杆菌K12,发现了细菌特有的接合现象。这有点类似于有性生殖生物中的性别,其中含有F因子(一种可以表达性菌毛的质粒)的可以类比为「雄性菌」,没有F因子的可以类比为「雌性菌」。「雄性菌」可以通过其上的性菌毛与「雌性菌」发生短暂的接合作用,这一短暂的接合当中,「雄性菌」会把这个F因子的质粒复制并转移给「雌性菌」,从而使之也变成「雄性菌」。这一现象的发现也为我们进行不同菌种之间的遗传物质交流等分子生物学及微生物遗传学的研究,提供了一个非常好的方法。铜绿假单胞菌在4摄氏度不生长。秃裸链霉菌
目前有很多保藏方法可以适用于真类菌的保藏,但大体来可以分为让真类菌连续生长的保藏工艺。这一类的保藏工艺的特点是不断的将菌株移植在新鲜的培养基上,并在合适的条件下生长,随后置于一个低温的环境中,一般是4-10摄氏度,这类保藏工艺主要包括斜面移植、油管保藏和蒸馏水保藏法等。二是利用干燥环境保藏菌株的休眠体,如分生孢子、厚垣孢子等,干燥选用的基质可以是空气、硅胶、土壤、沙子等。三是利用抑制菌株代谢活性的办法达到长期保藏,一般是通过脱水降低细胞内水分或低温冷冻,在此过程中关键环节是避免和降低冰晶对细胞造成的伤害,这类保藏工艺包括冷冻干燥法、低温冻结和液氮保藏法等。秃裸链霉菌德氏保加利亚乳杆菌LBY-27 嗜热链球菌 STY-31 婴儿双歧杆菌35624嗜酸乳杆菌 SDC2012,2013 鼠李糖乳杆菌 LC705.
注意事项:冻干粉菌种为菌种与脱脂奶粉溶液混合后,加入到真空冻干管里,经真空冻干制成。因菌种里面真空并且已经休眠,因此一定要按照本中心提供的说明书步骤进行活化。活化之后的菌种需要再传代2次,活力达到比较好。建议每代菌种都要做成甘油菌进行-80度冻存(厌氧菌需要在液氮条件下储存)。冻干粉菌种可以常温运输,收到后不开管可以在冷藏条件下保存3-15年。如果开管,就要马上全部用完。磁珠菌种为1代菌液与磁珠混合后,菌种充分被磁珠吸附。磁珠菌种含有12颗,可以使用12次。运输时候我们加入冰袋运输,收到后需要**温-80度冻存。甘油菌为做好的菌悬液与50%的甘油等体积混合后做成的形式,里面甘油浓度为20-25%。收到后可直接吸取100-200μL甘油菌接种到液体培养基中扩大培养。可以-80℃保存,保存周期3年。穿刺菌:穿刺菌为用接种针接种好菌种后插入到固体培养基中,经培养后,会在接种针穿刺的地方形成明显的穿刺线,收到该形式菌种后可挑取穿刺线上的菌接种到相应的培养基中,一定温度培养即可。可在4℃保存一个月。定量菌液一般为工作菌种(常规为三代)定量成客户要求的浓度,一般情况下是现配现发货。运输的时候我们会加入冰袋运输,-20度保存12个月。
金黄色葡萄球菌(Staphylococcusaureus,S.aureus)也称“金葡菌”,隶属于葡萄球菌属,是革兰氏阳性菌表示,为一种常见的食源性致病微生物。该菌较适宜生长温度为37℃,pH为7.4,耐高盐,可在盐浓度接近10%的环境中生长。金黄色葡萄球菌常寄生于人和动物的皮肤、鼻腔、咽喉、肠胃、痈、化脓疮口中,空气、污水等环境中也无处不在。金黄色葡萄球菌形态为球形,在培养基中菌落特征表现为圆形,菌落表面光滑,颜色为无色或者金黄色,无扩展生长特点,将金黄色葡萄球菌培养在哥伦比亚血平板中,在光下观察菌落会发现周围产生了透明的溶血圈。金黄色葡萄球菌在显微镜下排列成葡萄串状,金黄色葡萄球菌无芽孢、鞭毛,大多数无荚膜。是常见的引起食物中毒的致病菌。常见于皮肤表面及上呼吸道黏膜。金黄色葡萄球易被常用的碱性染料着色,革兰氏染色为阳性。
大肠杆菌对于药物产生抗性的过程也就是遗传基因的表达过程、质粒是存在于细菌细胞内单独染色体之外的遗传物质,是共价闭合环状双螺旋DNA分子、携带有耐药性基因的质粒称为耐药性质粒,耐药性质粒根据能否通过接合作用进行传递而分为接合性质粒(R质粒)和非接合性质粒(r质粒),接合性R质粒为耐药菌株的传播提供了物质基础,而r质料虽然不能通过接合作用进行传递,但可以通过噬菌体转导进行传递、此外,当r质粒与R质粒共同存在于一个菌细胞内时,在一定条件下r质粒可以被诱导而随同R质粒一起进行传递。另外,一个耐药性质粒可以携带多个耐药性基因,故一次传递就可使受体菌获得对抑菌药物的抗性、大肠杆菌的多重耐药性主要由接合性R质粒决定、耐药谱越广,R质粒检出率越高、R质粒越稳定,活性也越强,R质粒也越容易传播、大肠杆菌在人和动物的肠道中大量存在,因此它们携带的R质粒会在人与动物间、动物与动物间传递,使得由耐药菌引起的疾病流行不止。金黄色葡萄球菌中,腐生葡萄球菌数量更多,一般不致病。秃裸链霉菌
金黄色葡萄球对大部分维生素的抗性得到了提高。秃裸链霉菌
大肠杆菌的基因通常由4个字母的首字母缩写来命名,这些首字母缩略词源自它们的功能(已知时)并以斜体显示。例如,recA是根据它在同源重组中的作用加上字母A来命名的。功能相关基因被命名recB,recC,recD等等。蛋白质以大写首字母缩写命名,例如RecA、RecB等。当人类的基因组大肠杆菌测序完成后,所有基因在基因组中按其顺序编号(或多或少),并用b编号缩写,如b2819(=recD)。“b”的名字是由弗雷德·布拉特纳(FredBlattner)命名的,他领导了基因组测序工作。是用另一种大肠杆菌菌株W3110的序列引入的,该菌株在日本进行了测序,因此使用的编号以JW开头(JapaneseW3110),例如JW2787(=recD)。因此,recD=b2819=JW2787。然而,请注意,大多数数据库都有自己的编号系统,例如生态基因数据库将EG10826用于recD。然后,ECK编号专门用于大肠杆菌K-12MG1655菌株的等位基因。基因及其同义词的完整列表可以从数据库中获得,如EcoGene或Uniprot。秃裸链霉菌
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