培养基中营养物质浓度合适时微生物才能生长良好,营养物质浓度过低时不能满足微生物正常生长所需,浓度过高时则可能对微生物生长起抑制作用,例如高浓度糖类物质、无机盐、重金属离子等不只不能维持和促进微生物的生长,反而起到抑菌或杀菌作用。另外,培养基中各营养物质之间的浓度配比也直接影响微生物的生长繁殖和(或)代谢产物的形成和积累,其中碳氮比(C/N)的影响较大。严格地讲,碳氮比指培养基中碳元素与氮元素的物质的量比值,有时也指培养基中还原糖与粗蛋白之比。例如,在利用微生物发酵生产谷氨酸的过程中,培养基碳氮比为4/1时,菌体大量繁殖,谷氨酸积累少;当培养基碳氮比为3/1时,菌体繁殖受到抑制,谷氨酸产量则大量增加。再如,在维生素发酵生产过程中,可以通过控制培养基中碳源与迟效氮(或碳)源之间的比例来控制菌体生长与维生素的合成协调。某些培养基会在特定环境下产生特定的表型变化,例如MacConkey培养基生成红色菌落表示肠道杆菌的存在。MFC肉汤 GB
基础培养基:含有基础生长所需的基本营养成分,较常用的是肉浸液,俗称肉汤,主要成分含牛肉浸液和蛋白胨。基础培养基普遍用于细菌的增菌、检验,也是制备其他培养基的基础成分。营养培养基:在基础培养基中可加入葡萄糖、血液、生长因子等特殊成分,供营养要求较高的细菌和需要特殊生长因子的细菌生长。较常用的是血琼脂平板、巧克力血平板等。特殊培养基:包括厌氧培养基和细菌L型培养基等。前者是培养专性厌氧菌的培养基,除含营养成分外,还加入还原剂以降低培养基的氧化还原电势,如疱肉培养基、巯基乙醇酸钠培养基等。后者是针对细胞壁缺损的细菌L型,由于胞内渗透压较高,故培养基必须采用高渗低琼脂培养基。MFC肉汤 GB培养基中的各种成分会被微生物不同速率地利用,因此需要在适当的时间点更新培养基以维持细胞的生长状态。
在实验室里,培养基是一个必不可少的实验材料。预装培养基是目前较为普及的培养基形式,因其方便易用受到了普遍的喜爱。预装培养基的使用方法:使用预装培养基非常简单,只需要按照说明书上的指示,打开瓶盖,将培养基倒入培养皿中即可。但是,在进行培养实验前,需要将培养皿、孔板、试管、离心管等物品进行严格的消毒处理。在剥开瓶盖时一定要注意消毒操作,以免对实验结果产生影响。预装培养基在实验中的作用:预装培养基的较大优点就是方便。由于预装培养基可以直接使用,无需进行配制和消毒,因此可以帮助实验室工作人员节省大量的时间和精力。
预装培养基的有效期是指由于技术和保质问题而限定的使用时限。虽然预装培养基在生产过程中基本上是消毒处理的,但是在使用过程中,仍然会存在着微生物和其他污染因素对培养基的影响。因此,即使保质期未过,在使用之前也应检查其质量,并确保其适用于实验的要求。一般情况下,市售的预装培养基的保质期通常为6-12个月,但是这只是一个约定值,并不是通用值。在制造过程中,每个厂家都会考虑到不同的因素,如培养基成分、凝胶结构、包装方式和储存条件等,保质期因此也不一样。因此,在购买预装培养基时,我们应该认真查看其保质期,以便判断其可行性。使用干粉培养基进行细胞或微生物培养时,必须遵循严格的实验操作规程和生物安全标准。
如果干粉培养基使用后得以正确储存,也符合使用规范,完全可以重复使用。在使用之前,需要将其储存在密封的、不受光的容器中,以保持其干燥和细菌无菌。另外,为了增加干粉培养基的使用效率和可靠性,建议使用干燥无菌的器材来制备干粉培养基。在制备过程中,应充分混合干粉培养基和水,并在符合温度和时间要求的条件下灭菌。只有在这样良好的操作和储存环境下,干粉培养基才能保持干燥、无菌,质量得到保证。当然,为了保证实验的可重复性和一致性,建议在重复使用干粉培养基时,及时验证其培养效果。可以制备一定量的干粉培养基,将其分成若干批,每次只取一小部分用于实验。实验结果的一致性可以从不同批次之间的观察和比较中得到验证。自制培养基需要小心配比,防止成分误差或者污染。MFC肉汤 GB
孟德尔-韦伯利法可以计算培养基的可利用能量。MFC肉汤 GB
培养基的pH值对微生物的生长和繁殖有着重要的影响,因此有时候培养基会按照pH值的范围进行分类。中性培养基的pH值约为7.4,这种培养基适合于大多数微生物的生长繁殖,例如生长基(Nutrient Agar)就是一种中性培养基。酸性培养基的pH值在5.5到6.5之间,适用于某些菌株,如乳酸杆菌、酸性乳杆菌等。碱性培养基的pH值超过7.0,是为了培养生长于高pH环境的微生物,例如氢氧化物耐受乙酸杆菌等。预装培养基还可以根据其使用目的进一步分类。细菌富集培养基:细菌富集培养基的目的是收集低浓度的微生物,通常在自然样品中存在非常少量的微生物,因此必须富集到足够的量,才能进行接下来的试验。这种培养基通常添加有各种营养物质,以刺激微生物的生长。MFC肉汤 GB