鼠尾Ⅰ型胶原:组装液的配置:1.50mmol/L甘氨酸+200mmol/L氯化钾100mL,用1mol/L氢氧化钠调节酸碱度至9.2。2.胶原纤维的重构吸取胶原10μL至小培养皿中,倒入0.5mL自组装液,室温放置20min。予自组装液自组装24h。吸取0.05%戊二醛2mL至小培养皿中,将自组装24h的胶原浸泡在戊二醛中。然后将胶原经去...
查看详细 >>冻存细胞注意事项:冷冻保护剂可降低培养基的冰点,并可减缓冷却速度,较大降低冰晶形成的危险(冰晶可损伤细胞,导致细胞死亡)。注:DMSO可促进有机分子进入组织。操作含DMSO的试剂时,应采用与此类物质安全危害相适应的设备和操作规范,并应按照当地法规处置此类试剂。建议可使用厂商生产的无血清细胞冻存液,使用方便,复苏率高。注意冷冻保护剂DMSO...
查看详细 >>使用方法:1)细胞超净台无菌环境,1.5mlEP管内加入细胞混悬剂均匀混悬细胞,细胞终浓度为5×106个/ml,混悬液体积为200μl。细胞冻存剂冰水混合物中预冷,逐滴加入细胞冻存剂800μl,细胞混悬剂与细胞冻存剂的体积比控制在1:4。2)开启程序性降温,降温速率为1℃/min,较后降温至-80℃以下进行冻存。将比较例1冻存后细胞的复苏...
查看详细 >>染色的一般原则:因检测细胞的类型、凋亡诱导剂种类、使用的检测仪器不同,因而流式检测的荧光补偿也不同,因此建议每次检测均需使用凋亡诱导处理的细胞做单阳对照,进行荧光补偿的调节。标记抗体常用荧光素FITC,EGFP激发光:488nm发射光:525nm;使用面较广,价格便宜。PE激发光488nm发射光575nm,此荧光的激发效率较佳,故此荧光得...
查看详细 >>冻存细胞注意事项:冷冻保护剂可降低培养基的冰点,并可减缓冷却速度,较大降低冰晶形成的危险(冰晶可损伤细胞,导致细胞死亡)。注:DMSO可促进有机分子进入组织。操作含DMSO的试剂时,应采用与此类物质安全危害相适应的设备和操作规范,并应按照当地法规处置此类试剂。建议可使用厂商生产的无血清细胞冻存液,使用方便,复苏率高。注意冷冻保护剂DMSO...
查看详细 >>细胞外基质:在生物学中,细胞外基质是细胞外大分子(如胶原蛋白、酶和糖蛋白)组成的三维网络,为周围细胞提供结构和生化支持。因为在不同的多细胞谱系中,其多细胞化特性是自立进化的,因此,细胞外基质的组成在不同的多细胞结构之间有所不同;然而,细胞粘附、细胞间通讯和分化是细胞外基质的共同功能。动物细胞外基质包括间质基质和基底膜。间质基质存在于各种动...
查看详细 >>糖原染色试剂盒(1)急性淋巴细胞白血病、淋巴组织恶性增生性疾病、红白血病、戈谢病的原始细胞呈强阳性反应或阳性反应;缺铁性贫血、珠蛋白生成障碍、骨髓增生异常综合征亦可呈阳性反应;急性粒细胞白血病、急性单核细胞白血病、良性淋巴细胞增多症、尼曼-皮克细胞呈阴性反应或弱阳性反应。巨幼细胞性贫血、溶血性贫血、再生障碍性贫血等,幼红细胞为阴性反应。偶...
查看详细 >>细胞外基质的主要类型及功能:a.骨的胞外基质表现为刚硬的特点,以满足支撑的作用b.软骨是另一种结缔组织,其胞外基质具有一定的韧性c.眼角膜中胞外基质是透明的保护层。如前所述,动物组织的构建既是多细胞相互作用的结果,也是细胞与胞外基质相互作用和接触的结果。胞外基质不光为组织的构建提供的支撑框架,还对与其接触的细胞的存活、分化、迁移、增殖与形...
查看详细 >>细胞质和细胞核RNA提取试剂盒特点:1.有效分离和提取细胞质RNA,与细胞核RNA。2.方便快捷的离心柱操作方式。3.提取的RNA,品质高,产量多。4.试剂盒不含苯酚,可提取所有RNA(含MicroRNA)。5.纯化的RNA可用于任何应用,包括RT-PCR,qRT-PCR,RNA-Seq,阵列等。6.细胞质RNA不含DNA,可直接用于RT...
查看详细 >>细胞外基质的作用:参与细胞的迁移:细胞外基质可以控制细胞迁移的速度与方向,并为细胞迁移提供“脚手架”。例如,纤粘连蛋白可促进成纤维细胞及角膜上皮细胞的迁移;层粘连蛋白可促进多种细胞的迁移。细胞的趋化性与趋触性迁移皆依赖于细胞外基质。这在胚胎发育及创伤愈合中具有重要意义。细胞的迁移依赖于细胞的粘附与细胞骨架的组装。细胞粘附于一定的细胞外基质...
查看详细 >>RNA的提取:众所周知,Trizol是一种RNA提取试剂,内含异硫氰酸胍和酚等物质,能迅速破碎细胞和溶解细胞中的其他成分,压制细胞释放出核酸酶,维持细胞中RNA的稳定性,我们可以在反应物中加入Trizol后摇匀,在加入氯仿离心,这样的话我们的RNA就进入了水相中,再用异丙醇沉淀水相中的RNA,即可达到提取总RNA的目的了。首先我们需要称取...
查看详细 >>外泌体的提取、分离方法:免疫亲和层析法。免疫亲和层析法是利用生物体内存在的抗原、抗体之间高度特异性的亲和力进行分离的方法,主要用于生物大分子的分离、纯化。将其应用于外泌体的分离主要是借助外泌体表面的特异性抗体,如TSG101或四跨膜蛋白。此方法的原理是利用抗原抗体的特异性结合,只有囊泡表面有特异性的抗体才可以被识别,这使得提取的外泌体纯度...
查看详细 >>