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数字ELISA基本参数
  • 品牌
  • 芯弃疾JX-8B
  • 产品名称
  • 数字ELISA
  • 用途
  • 应用范围:各种高灵敏多重免疫检测,可替代各种ELISA试剂盒
  • 生产企业
  • 勃望初芯
  • 有效期
  • 12个月
  • 优势
  • 多重、超敏、微量、极速、灵活、开放
数字ELISA企业商机

芯弃疾JX-8B数字ELISA产品

每个生物实验室都用得起的单分子免疫检测

人类形式的蛋白质被加入到25%牛血清中以代替临床测试样本;通常使用四倍稀释因子以减少免疫测定中的基质效应4。使用数字ELISA检测25%血清中的PSA,从该实验中确定了LOD为~50aM(1.5fg/mL),相当于整个血清中的LOD为~200aM(6fg/mL)。检测到的比较低浓度为250aM,相当于25%血清中的1fMin全血清。由于LOD是通过外推背景浓度来确定的加上背景的三个标准差,不同运行的LOD取决于背景的CV。在具有典型背景方差的几个实验中,全血清PSA的亚飞摩尔LOD得以保持。相比之下,一种前列的商业PSA检测方法(ADVIACentaur,西门子)报告在人血清中的LOD为3pM(0.1ng/mL),并且已经报道了LOD在10-30fM17,26。 新型的单分子检测方法的普及版;科研数字ELISA灵敏度

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每个生物实验室都用得起的单分子免疫检测

由于活性珠子的百分比接近50%(酶与微球的比例大于~1:1.5),然而,使用图像分析软件区分“开启”和“关闭”孔变得具有挑战性,我们达到了数字动态范围的实际上限。例如,图2中7fM(~45%活性)的信号偏离了线性。因此,这里使用50,000个孔展示的数字线性动态范围是从3.5fM到350zM,即大约四个对数单位。前提是蛋白质使用适当的酶浓度进行标记,这种动态范围对于许多临床应用来说是足够的 科研数字ELISA灵敏度芯弃疾JX-8B单分子ELISA检测产品,10ul样本可同时测2-4个指标!

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每个生物实验室都用得起的单分子免疫检测

动力学上,对于200,000个微球分散在100μL中,珠子之间的平均距离约为80μm。大小为TNF-α和PSA(分别为17.3和30kDa)的蛋白质将在不到1min的时间内扩散80μm。表明,在2小时的孵育过程中,蛋白质分子的捕获不会受到限制动力学上。其次,必须有足够的珠子被加载到阵列上以限制泊松噪声。200,000个珠子加载到50,000孔阵列中,通常会导致20,000–30,000个微球被困在1mL孔中。对于典型的背景信号为1%活性微球(见下文),这种装载导致背景信号为200-300个活性微球检测到,对应于泊松噪声的可接受变异系数(CV)为6-7%。第三,过高的微球浓度可能导致:a)非特异性结合增加,降低信噪比;以及b)分析物与微球的比例过低,导致活性微球的比例过低,从而导致泊松噪声引起的高CV。这些因素的平衡NatBiotechnol.作者手稿;可在PMC2010年12月1日获得。Rissin等人第5页因素意味着每100μLoftest样品含有20万到100万颗珠子是比较好的数字ELISA。同时,为了获得可接受的背景信号(1%)和泊松噪声)。

芯弃疾JX-8B数字化高灵敏ELISA芯片检测产品;应用范围:各种高灵敏多重免疫检测,可替代各种ELISA试剂盒,及其他免疫检测产品。
参考原理:通过量化异常水平的生物标志物来检测新生疾病过程是诊断和治干预的关键,以在出现继发性临床症状之前进行干预。蛋白质和核酸生物标志物的发现和验证已成为生物制药研究、靶向临床研究设计以及早期疾病诊断追求的主要驱动力。1–4由于蛋白质生物标志物提供了比核酸更多的下游信息内容,因此它们可能作为临床决策工具具有比较大的潜力。5据估计,人类蛋白质组来源于超过20,000个基因,且循环中有超过4000种分泌蛋白。6,7这些分泌蛋白中不到十分之一(375种)可以通过蛋白质测定技术可靠地测量。6在这些可测量的蛋白质中,几乎有一半(171种)已由美国食品药品监督管理局(FDA)批准的诊断测试,8个指出了蛋白质生物标志物对人类健康的重要性。每个生物/医学实验室都用得起的单分子免疫检测;

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创新性的解决方案:芯弃疾JX-8B数字ELISA

我公司推出的数字化高灵敏ELISA芯片检测产品应用场景:适合生物实验室、医学实验室、科研市场、产品预研、产品开发、ELISA检测、动物病情检测等各种应用场景应用范围:各种高灵敏多重免疫检测,可替代各种ELISA试剂盒,及其他免疫检测产品。

根据目标蛋白的抗体制备了功能化的微球生产商说明。含有目标蛋白的100-μL测试溶液与200,000个磁珠悬浮液孵育2小时至23°C。然后将磁珠分离并用PBS和0.1%Tween-20洗涤三次。磁珠重新悬浮后与含有检测抗体(通常约为1nM)的溶液孵育45分钟。在23°C下最小值。然后将珠子分别用PBS和0.1%洗涤三次。Tween-20。将珠子与含有SβG(1–50pM)的溶液在23°C孵育30分钟,然后分离并在PBSand0.1%Tween-20中洗涤六次。随后将珠子重悬于10μLofPBS中,并加载到飞升液位阵列中。整个实验的总时间约为~6小时。 芯弃疾JX-8B单分子小型化ELISA检测产品,多重检测,同时测试2-6个检测项目;科研数字ELISA灵敏度

芯弃疾JX-8B数字ELISA,超敏检测,常规试剂可轻松达到0.2pg!科研数字ELISA灵敏度

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每个生物实验室都用得起的单分子免疫检测

数字ELISA测量蛋白质浓度远低于传统ELISA的能力源于两种效应:1)SiMoA对酶标记的高度敏感性;以及2)通过数字化蛋白质检测可以实现的低背景信号。任何免疫测定的灵敏度由其灵敏度决定。检测技术到标签,抗体亲和力,试验背景,以及背景测量值的变异(%CV)27.SiMoA对酶非常敏感标签(图2)为在数字ELISA中检测亚飞摩尔浓度的标记蛋白提供了基础。也就是说,对于给定亲和力的抗体,其灵敏度为免疫测定将由测定背景决定,SiMoA的高标记灵敏度有助于降低这种背景。对照实验表明,数字ELISA的背景来自于检测抗体和酶的非特异性结合(NSB)与捕获珠表面结合(补充表2)。AsSiMoA相比传统检测方法具有更高的标记灵敏度,明显减少了检测抗体(~1nM)和酶标记物(1–50pM)的需要,以检测结合事件,与传统方法相比(标记试剂浓度~10nM)。降低的标记物浓度减少了NSB到捕获表面,从而导致背景信号明显降低。 科研数字ELISA灵敏度

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