重庆10X Chromium X单细胞测序数据分析可视化

针对单细胞测序数据分析时的reads数、基因表达量及细胞数量判定过程中：以捕获5000个细胞、100G的测序量为标准，每个细胞的reads数大约在50k左右；每个细胞的基因中位数取决于样本的细胞类型，例如成熟的B，T，粒细胞数量较多的组织中，由于该类型细胞表达的基因数普遍较少，导致基因中位数下降。而某些疾病组织、或者体外培养的如干细胞等，他们的基因表达数较高，甚至可以超过1W，这就导致该类样本基因中位数非常高。因此，我们对细胞数量以及基因中位数确认时，需要考察实际组织的细胞组成。高通量测序技术是对传统测序一次颠覆性的改变，一次对几十万到几百万条核酸序列进行测定。重庆10X Chromium X单细胞测序数据分析可视化

烈冰生物搭建近10台10XGemomics平台，目前为全国范围内的高校、医院和研究所等单位的科研学者提供鼓舞，10X微流体“双十字”交叉系统为8或16通道系统，每个通道上限可捕获20000细胞，16通道一次可检测细胞范围为百万级别的细胞水平。此外，单个细胞捕获效率高达65%，可准确鉴别稀有细胞类型，利于稀有样本或小细胞量类型样本研究；细胞可适性高，对细胞大小（直径超过40um细胞需要制备成细胞核）及类型无限制。细胞捕获周期较短，能够实现自动分离，无需人工操作，1天内可完成从细胞悬液到cDNA文库构建的所有的测序准备工作。重庆10X Chromium X单细胞测序数据分析可视化烈冰科技已建立了多种国际和国内主流的高通量测序实验平台。

一味的追求高细胞数量的捕获，小心得不偿失，原因在这：单细胞测序所有的分析都是基于细胞聚类进行，而细胞聚类是在区分cell和non-cell后，获得细胞基因表达谱，通过降维（pca），无监督聚类以及可视化（t-SNE）得到的。进行细胞聚类时需要考虑到每个细胞的基因表达模式，因此即使是相同的数据，在剔除几个细胞的情况下，前后获得的聚类图也会出现明显不同。而当细胞捕获数过多时，无论是假阴性和假阳性数据还是多细胞数据，都会对正常细胞聚类产生影响，造成聚类结果失真。这也是很多文章，特别是很多高分文章，为什么单个样本捕获细胞数在2000-3000的原因了。烈冰建议单个样本捕获细胞数在3000-5000个时，数据量在100G左右时，可以满足分析和文章发表的多重需求。

相对于Smart-Seq技术在细胞数量上的问题，10X平台普遍提供的细胞数量都在1000-20000不等的测序细胞量，这个量级的测序细胞量已经可以说能够完全覆盖绝大部分组织的Single Cell群体类型。因此，这两种技术对于基于基因表达进行准确细胞分型上，无论是从细胞数量上来说还是表达检测可靠性来说，都会更实用。同时依托Random Cell Label技术，使得其对于NovaSeq、HiSeq X Ten、Hiseq 4000等设备存在的Index hooping现象，相对于Smart-Seq数据来说，影响几乎可以忽略不计（10X Genomics官方网站曾给出hooping测试结果，显示无影响。单细胞多组学测序可识别重要的转录因子，进行谱系和发育追踪。

单细胞测序技术（Single Cell Sequencing）从一种新兴的研究角度，借助已有的高通量测序手段，帮助研究者在样本中细胞的异质性、免疫微环境、发育学、免疫学以及其他领域中进行单细胞层面的数据解析，解决了Bulk Population Sequencing所无法解决的问题。这样一个新的研究领域必然也需要足够可靠的实验手段来支撑。BD Rhapsody单细胞分选系统为此提供了完善的硬件设备，保证了从单细胞悬液质量评估到单细胞分选标记过程中每一个实验步骤的准确质控。NovelBio单细胞实验团队借助BD Rhapsody单细胞分选系统，在实验实施层面对单细胞测序结果的可靠性提供了强有力的保证。继单细胞悬液制备之后，又在另一道关键关卡提供了可靠的支持，帮助研究者在单细胞测序领域收获更多的成果。单细胞测序技术的迅速发展和应用推广，为从多维度揭示疾病发展提供了强有力的工具。重庆10X Chromium X单细胞测序数据分析可视化

全线搭建10X Genomics Chromium Controller单细胞测序平台。重庆10X Chromium X单细胞测序数据分析可视化

细胞计数和活力评估在评估样本质量时，需要在细胞清洗和过滤之后测定细胞活力，这一点至关重要。测定细胞活力有许多种方法，烈冰多年单细胞测序经验发现台盼蓝法在鉴定活细胞与死细胞的比例时效果很好。细胞计数的准确性以及目标回收量和实际回收量之间的一致性，取决于我们了解样本中有多少个细胞。一旦过滤和清洗完成，可采用细胞计数设备（如血球计数器或自动细胞计数仪）进行定量。这些设备不但能提供准确的细胞计数，还能计算出向微流体芯片上样适量细胞所需的细胞悬液体积。重庆10X Chromium X单细胞测序数据分析可视化

上海烈冰生物医药科技有限公司属于医药健康的高新企业，技术力量雄厚。烈冰生物是一家有限责任公司（自然）企业，一直“以人为本，服务于社会”的经营理念;“诚守信誉，持续发展”的质量方针。公司业务涵盖单细胞测序，生物大数据云分析平台，空间转录组测序，单细胞多组学测序，价格合理，品质有保证，深受广大客户的欢迎。烈冰生物顺应时代发展和市场需求，通过**技术，力图保证高规格高质量的单细胞测序，生物大数据云分析平台，空间转录组测序，单细胞多组学测序。