温州正规无血清细胞冻存液生产厂家

无血清快速细胞冻存液冻存液成分。无血清细胞，无血清干细胞及MSC冻存液。保存条件：储存于4℃以下。质量保障期从产品的生产日期起，为期3年。3个月以上没有使用冻存液计划时，尽可能冷冻保存。为避免重复冻融过程可能导致的冻存液品质下降和性能降低，推荐将100ml产品分装小瓶后，再存放于4℃以下或-20℃冰箱冻存。无血清细胞冻存液，细胞冻存与复苏后，平均活细胞回收比例超过80%。与含血清冻存液比较，BI无血清冻存液细胞存活率都有较佳的表，BI无血清细胞冻存液也适用于动物血清培养的细胞冻存。无血清细胞冻存液产品性能：不含动物来源性蛋白，能减少各类病毒、霉菌和支原体等的污染。温州正规无血清细胞冻存液生产厂家

无血清细胞冻存液：1.逐滴加入5-7mL的预热的培养基到15mL的离心管中，加入的同时轻轻混匀。2.室温（15-25°C）以300xg离心5分钟。3.吸出培养基，使细胞沉淀完好无损。使用2mL血清移液管轻轻将细胞沉淀重悬于1mL的培养基中。小心保持细胞作为聚集体。4.将0.5mL的细胞混合物转移到含有培养基的预包被的6孔板的培养孔中（例如，每个冷冻管可以铺板两个孔）。注意：铺板多少孔可能需要根据冻存的细胞聚集体数量进行调整。通常在复苏后，要比在常规的传代铺板更多的细胞聚集体数量。将培养板放入37°C培养箱。快速前后左右的摇晃培养板数次，将细胞聚集体分布均匀。24小时内不要移动培养板。温州正规无血清细胞冻存液生产厂家无血清细胞冻存液：2-8℃即可稳定保存，无需冷冻，即取即用。

新常态下细胞冻存指南：细胞冻存及复苏的基本原则是慢冻速融，实验证明这样可以较大限度的保存细胞活力。目前细胞冻存多采用甘油或二甲基亚砜作保护剂，这两种物质能提高细胞膜对水的通透性，加上缓慢冷冻可使细胞内的水分渗出细胞外，减少细胞内冰晶的形成，从而减少由于冰晶形成造成的细胞损伤。复苏细胞应采用快速融化的方法，这样可以保证细胞外结晶在很短的时间内即融化，避免由于缓慢融化使水分渗入细胞内形成胞内再结晶对细胞造成损伤。典型的细胞冻存液是在生长培养基中加入5%到10%的DMSO和5%到40%的血清，或只是在血清中加入10%的DMSO。目前在有些实验室中仍然采用这种自制自配的冻存液，优点是成本低，适合自己的细胞。

无血清细胞冻存液的用途：用途：1.无血清细胞冻存液用于造血干细胞、间充质干细胞等干细胞的储存。2.无血清细胞冻存液用于T淋巴细胞、NK细胞等免疫细胞的存储。3.无血清细胞冻存液用于其他类型哺乳动物细胞的储存。无血清细胞冻存液产品性能：1.不含牛血清，无动物源组分。传统的冻存液，一般由胎牛血清、DMSO等组分组成。胎牛血清取自牛，因此，难以应用到需要避免接触动物源的应用领域。用包括人白蛋白等蛋白组分替代血清的用途，无动物源组分。2.2-8℃即可稳定保存，无需冷冻，即取即用。为了避免反复冻融，传统的细胞冻存液，需要分装成小管后置于-20℃环境下保存。无血清细胞冻存液，2-8℃保存即可，无需再进行分装。反复吹吸混匀后，分装于细胞冻存管中，每管500ul-1000ul。

干细胞无血清冻存液操作事项：使用说明：1.细胞消化和计数，用胰酶对待冻存的细胞进行消化，并对细胞进行计数。2.1000转/min离心5分钟（4℃），去掉上清。3.根据细胞计数的情况，加入适量的干细胞无血清冻存液，使细胞密度在1×106左右（或根据自己希望达到的细胞密度）。4.轻轻地重悬细胞（务必重悬均匀）。5.将重悬的细胞按等份加入到灭菌的冻存管（需提前做好标记或者贴上标签）中，旋紧冻存管盖。6.将冻存管放入冻存盒中，然后将冻存盒直接放入-80℃。7.第二天将细胞从-80℃转移到液氮中。注意事项：1.用处于对数生长期的细胞进行冻存。2.控制好胰酶的消化时间，切记消化过度，会影响复苏效果。3.重悬细胞的过程中，请务必要轻柔，以免损伤细胞，但同时也一定要充分重悬，这样细胞在复苏时才不会成团。4.细胞操作请注意无菌。无血清细胞冻存液产品性能：通常细胞冻存液的配方是由胎牛血清加上DMSO组成。温州正规无血清细胞冻存液生产厂家

无血清细胞冻存液存储条件：3个月以上没有使用冻存液计划时，尽可能-20℃冷冻保存。温州正规无血清细胞冻存液生产厂家

细胞冻存和复苏操作步骤：细胞冻存和复苏采取“慢冻快融”的原则，慢速冷冻可使细胞内的水份渗出细胞外，减少细胞内形成冰晶的机会，快融以保证细胞外结晶快速融化，避免慢速融化水份渗入细胞内，再次形成胞内冰晶造成对细胞的损伤。细胞冻存及复苏的基本原则是慢冻快融，实验证明这样可以比较大限度的保存细胞活力。目前细胞冻存多采用甘油或二甲基亚砜作保护剂，这两种物质能提高细胞膜对水的通透性，加上缓慢冷冻可使细胞内的水分渗出细胞外，减少细胞内冰晶的形成，从而减少由于冰晶形成造成的细胞损伤。复苏细胞应采用快速融化的方法，这样可以保证细胞外结晶在很短的时间内即融化，避免由于缓慢融化使水分渗入细胞内形成胞内再结晶对细胞造成损伤。温州正规无血清细胞冻存液生产厂家