Opti-MEM转染试剂供应商

细胞转染实验是生物医学实验室中**常规的研究手段，目的是把外源基因、蛋白或者小分子导入到靶细胞内。目前主要有三种主流方法：生物转染，物理转染和化学转染。其中生物转染主要是利用***等微生物作为基因导入载体，以慢***、腺***和腺相关***等**常见，其侵染效率可以达到90%以上，但常因安全性等问题，很多实验室对其敬而远之。物理转染主要包括显微注射、电穿孔和基因***，无论哪一种都需要特定的设备，且一分钱一分货，性能好的价格也都很性感电转化化学转染方法是生物医学研究中**常用的转染方法，主要包括两类：阳离子脂质体和阳离子聚合物。其基本原理是利用阳离子的化学分子与带有负电荷的核酸通过正负电荷作用形成稳定的复合物。原代细胞直接分离自组织并在适当条件下增殖.Opti-MEM转染试剂供应商

胞因素用低代数的细胞293T细胞非常重要！！当然也要保证细胞状态特别好，没有细微污染，铺板均匀。饱满状态好的细胞才可以产生较高滴度的***哦！

载体系统在实验中**常见的慢***载体系统有三质粒系统、四质粒系统，当然使用三质粒系统的小伙伴居多，一定要选择成熟商业化的载体系统！载体构建和质粒抽提纯化我们要注意是否构建时导致质粒载体重组或某个部件缺失，或污染别的质粒、杂物?中抽纯化是否污染?要养成同时做阴性对照的习惯：建议目的基因载体和阴性对照GFP 载体是同一批，且建议每次包装都如此操作，要保证目的基因的表达载体构建纯化良好，质粒间比例得当，并且对质粒进行酶切验证. Opti-MEM转染试剂供应商正确的了解您希望输送的运载物是选择可靠转染产品的第一步。

简介：X-tremeGENE HP DNA转染试剂是一种高效的无动物源成分的低毒转染试剂，兼容含血清或不含血清的培养基，可用于转染各类真核细胞(包括昆虫细胞)以及多种难转染细胞系。优势：

1.简单易用的多组分混合试剂，无动物源性成分，室温稳定。

2.高转染效率，对于原代细胞和使用其它试剂难转染的**细胞系有高转染效率。

3.使用细胞毒性低的试剂，结果相关性好。

图2. X-tremeGENE HP高效低毒的转染性能。通过X-tremeGENE HP和脂质体转染方法将GFP表达质粒转染至CHO-K1。A和C图的荧光视野显示了实验后两种方法均获得了成功转染的细胞。但B和D图的明亮视野表明脂质体转染方法的细胞毒性远高于X-tremeGENE HP，导致存活细胞量减少(图片来源于网络)。

转染 48 小时后，使用尼康荧光显微镜 GFP 荧光进行成像（左侧四幅图），A：LipoD293； B：293fectin；C：Xfect 和 D：Fugene 6.  带有 6xHis 标记的 GFP 荧光蛋白使用 Ni-NTA 亲和柱技术实现分离。5 微升洗脱液载入 SDS-PAGE 凝胶电泳分离并进行 Coomassie 亮蓝染色（右上图 E），道 1 为 LipoD293293、道 2 为标准蛋白分子、道 3 为 Xfect、道 4 为 293fectin 和道 5 为 Fugene 6。这四种转染试剂产生蛋白质的效率被进一步定量（见右下图 F）。产生慢***的比较

通过 LipoD293™ 试剂（升级版）和 Lipofectamine LTX（LTX）试剂将三个 cDNAs 共转染进 293T 细胞。一个 GFP 载体，pHR-SIN-cppt-CMVEWP 被用来测定慢***的滴度。在 24 孔板中每孔加入 1x10^5 293T 细胞，其次是分别添加不同量的慢定都上清液，1 微升（上图）和 10 微升（下图）。 siRNA脱靶效应会导致细胞死亡，并引起分析问题。

用LipoFectMax™转染Hela细胞，左图转染GFPcDNA，右图共转染GFPCDNA和GFP靶向siRNA。转染siRNA后可以从右图明显看到基因沉默。4适用于神经细胞的转染图4.用LipoFectMax™和LipoFectamine®2000分别对小鼠神经元细胞进行转染绿色荧光白蛋白（GFP），转染24小时后观察转染效果，LipoFectMax™转染效率（左图）比LipoFectamine®2000（右图）高5倍。LipoFectMax™转染试剂转染试剂操作流程细胞毒性低图2.LipoFectMax™，LipoFectamine®2000及LipoFectamine®3000分别对A549细胞进行转染操作，通过计算转染后的细胞存活率比较细胞毒性.转染复合物制备完成； 混匀后室温下孵育15-20分钟，直接取10μL加入已铺好细胞的孔中.Opti-MEM转染试剂供应商

连续细胞系具有无限增殖的潜能，通常要比原代或有限细胞更易处理。Opti-MEM转染试剂供应商

Lipofectamine RNAiMAX转染试剂是先进、高效的siRNA输送解决方案。目前尚无其他siRNA转染试剂能够在***的细胞系中（包括常见细胞类型、干细胞、原代细胞以及历来难转染的细胞类型）提供如此简便、高效的siRNA输送效果。

高效

可在低siRNA浓度下获得优良的转染效果

相对于其他的siRNA转染试剂，Lipofectamine RNAiMAX 转染试剂可以获得更佳的基因***效果。同在10 nM和1 nM p53 siRNA下，Lipofectamine RNAiMAX转染试剂实现了更高的有效***细胞/未转染细胞比率，超过其他RNAi试剂。 Opti-MEM转染试剂供应商

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