Heathybran,Alheimer'sbrain健康大脑。_Azheimers bran___健康大脑。Aheimer'brain。 Heathybrin。来自阿尔茨海默氏症患者的人脑样本和来自健康供体的细胞裂解细胞凹蛋白提取试剂(目录号71009)。样品是连续的稀释并通过SDS凝胶电泳分离。 s喱被转移到Immobilone-p膜上。印迹是使用MultiBlot在SNAP i.d.e 2.0系统中进行处理,迷你和Midi镜架及其相应的吸墨纸支架。通过标准免疫检测处理对照印迹所有印迹均用0.5%NFDM封闭并用一级抗Taul(目录号MAB3420)和二级HRP-共轭山羊抗小鼠(AP124P)在以下条件下如上所示。印迹与Luminata“ m Forte一起孵育将HRP基板放在X射线胶片上采购正规细胞计数器哪家靠谱?Merck电阻仪Merck仪器咨询问价
Westem HRP基材。高背景分锁不足更改为不同的阻止解决方案。吸笔架不够湿组装前,先将吸墨纸架弄湿。阻塞解决方案可能有始终准备新鲜的0.5%脱脂/低脂干奶。降级的抗体浓度过高降低抗体的浓度。吸笔架朝上放置将印迹架朝上放在蛋白素框架中。在框架中洗涤不足进行至少4次每次30 mL的洗涤。添加清洗剂时,确保真空连续运行缓冲。整个系统电平不一致的信号确保系统在平坦的水平表面上。污点抗体不均匀补充封闭液和抗体稀释剂遍及整个表面0.1%Tween 20表面活性剂。吸墨纸架使用小量移液器(例如5毫升),慢慢散布整个印迹中的抗体。应用至少2.5 mL(用于MultBlot),5 mL(用于Mini blot)或10 mL(用于Midi印迹)抗体。抗体体积低没有抗体回收盘确保抗体中的孔,回收托盘algnMerck电阻仪Merck仪器咨询问价上海益启生物Merck仪器订购方便。
项卡(图8)创建和启动自定义协议。要手动控制流量,使用“手动模式”标签选择所需的井,压力,和温度(如果使用加热歧管)。有关自动化协议或每次融合的手册,请参阅CellASICO《ONIX2微流体系统用户指南》。注意:对于需要快速交换溶液的实验,请执行以下操作可以应用以下技术:高压(55.2kPa[8psi)下的流量对于初始过渡,然后将流量减小到标准压力长期暴露于6.9-13.8kPa(1-2psi)。 软件操作下图显示了使用ellAsICEONX2软件进行实验的两种模式,请参阅CllASICEONIX2MicrofuidieSystem用户有关软件功能的详细信息的指南。图7.手动模式降低了ONIX2系统的迭代操作。可以手动设置操作参数,此模式a5o提供了选项运行简短的自动印版设置序列,这些序列
PO缓冲液WBAVDP零零15零零毫升BLOT-QuickBlockerTM试剂WB57-175GM175克;Probumin@牛血清白蛋白8204731零零克5%碱溶性酪蛋白225毫升免疫组织化学(IHC)程序的组件SNAPi.d.@2.0免疫组织化学框架SNAP2FRIHC1个SNAPi.d.92.0IHC幻灯片固定器SNAP2SH2个配件过滤钳,钝端,不锈钢XX62零零零零6P31L真空过滤瓶XX10047051个SNAPi.d.@2.0墨粉辊SNAP2RL1个高输出泵,115伏,60赫兹WP621156零1个高输出泵,100伏,50/60HzWP62100601个高输出泵,220伏,50赫兹WP6222零5零1个真空管,内径6.4毫米x3m(内径4/4英寸x10英尺)MS上海益启生物细胞跨膜电阻仪订购方便。
阳光直射的地方。 细胞培养使用CellASICOONIX2微流体系统进行细胞培养1.从孔中吸出溶液以用于灌注(孔1-5)。向这些孔中添加350μL培养基。确保未使用溶液入口孔中充满了缓冲液。2.清空6号和8号孔,以确保在更换过程中正确交换溶液灌注。3.按照以下说明将微流体板密封到0NIX2歧管上CellASICOONIX2微流体系统用户指南。4打开CellASICOONIX2软件,选择“新建”之一实验选项,然后在下拉列表中找到B04A板。单击协议编辑器选项卡,然后输入所需的步骤,然后情况。对于1-5井,建议的压力为6.9-13.8kPa(1-2psi)可提供足够的营养,并且营养含量极低压力。有关创建协议的信息,请参阅CellASICB《ONIX2微流体系统用户指南》。5.为了监测细胞生长,将益启生物公司带您了解样本制备仪详情。Merck电阻仪Merck仪器咨询问价
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白的免疫检测:SNAP i.d.“ 2.0系统与SNAP 1.d.系统(首先代)与标准免疫检测一种。 SNAPi.d。 2.0蛋白质检测b。快照蛋白质检测。标准系统Midi印迹系统首先代,单孔免疫检测对照,茴香霉素处理和PDGF处理的3T3小鼠成纤维细胞裂解液(10-0.63 ug)被转移到Immobilon9-P膜上。印迹被阻止含0.5%的非脂肪干mik(NFDM),并在加筋的盐水中制备含0. 1%Tweene 20表面活性剂(TBST),并用主要抗B-Tubulin探测(MAB3408)和次级HRP偶联的山羊蚂蚁(AP1 24P)在上述条件。将印迹暴露于X射线胶片一分钟。图2. erbB2的免疫检测:SNAP i.d.9 2.0系统与SNAP i.d.系统(首先代)与标准免疫检测s。 SMerck电阻仪Merck仪器咨询问价