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医学实验外包,外泌体检测,由于外泌体的主要功能被认为是细胞之间的信息传递,了解它带有的蛋白质和多种RNA上的信息就变得尤其重要。2019年外泌体中标项目中带有热门话题miRNA、lncRNA和环状RNA的项目数量如下图(图4)所示。我们可以看到,外泌体中的miRNA和lncRNA过去研究的是比较多了,例如发表在Hepatology(IF=14.971)上的一篇文章表明肝*细胞释放的外泌体miRNA调控巨噬细胞程序性死亡配体1的表达。另一篇文章发现胆管细胞来源的外泌体LncRNA H19促进肝星状细胞活化和胆汁淤积性肝纤维化。相对的,外泌体中的circRNA研究目前还较少,而circRNA分子自身独特的稳定性、组织特异性、时序和疾病特异性等,使它很有可能成为外泌体检测的下一个热门分子。

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医学实验外包,circRNA Pulldown(环状RNA)介绍:使用生物素RNA探针,与细胞裂解液孵育,形成探针-circRNA-蛋白质复合物。该复合物可与链亲和素标记的磁珠结合,从而与裂解液中的其他成分分离。磁珠复合物洗脱后,可通过western blot实验或质谱实验检测特定的circRNA结合蛋白是否与circRNA相互作用。RNA pull-down实验就是先将RNA进行标记(如生物素探针标记),再与细胞裂解液共同孵育,从而形成RNA-蛋白质复合物,之后再分离复合物得到蛋白质,通过western blot 或mass Spectrometry检测蛋白质的技术。目前RNA pull-down技术已成为研究miRNA、lncRNA与相互作用蛋白的主要技术手段之一。安徽值得信赖的医学实验外包外包

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