高效液相色谱法介绍基本原理高效液相色谱(HighPerformanceLiquidChromatography,HPLC),是在经典液相色谱法的基础上,于20世纪60年代后期引入了气相色谱理论而迅速发展起来的。与经典液相色谱法的区别是填料颗粒小而均匀。因为较小的填充颗粒具有高柱效,但会引起高阻力,需用高压输送流动相,故又称高压液相色谱。使用高效液相色谱时,液体待检测物被注入色谱柱,通过压力在固定相中移动,由于被测物种不同物质与固定相的相互作用不同,不同的物质顺序离开色谱柱,通过检测器得到不同的峰信号,通过分析比对这些信号来判断待测物所含有的物质。高效液相色谱作为一种重要的分析方法,***地应用于化学和生化分析中。高效液相色谱从原理上与经典的液相色谱没有本质的差别,它的特点是采用了高压输液泵、高灵敏度检测器和高效微粒固定相,适于分析高沸点不易挥发、分子量大、不同极性的有机化合物。上海禹重实业有限公司是一家专业提供液相色谱系统的公司,有想法的不要错过哦!宝山区赛默飞世尔液相色谱系统价格
高效液相色谱相关术语峰面积(peakarea,A)—峰与峰底所包围的面积。保留时间(retentiontime,tR)——从进样开始到某个组分在柱后出现浓度极大值的时间。理论塔板数(theoreticalplatenumber,N)——用于定量表示色谱柱的分离效率(简称柱效)。分离度(resolution,R)——相邻两峰的保留时间之差与平均峰宽的比值。也叫分辨率,表示相邻两峰的分离程度。R≥1.5称为完全分离。《中国药典》规定R应大于1.5。拖尾因子(tailingfactor,T)——T=,用以衡量色谱峰的对称性。也称为对称因子(symmetryfactor)或不对称因子(asymmetryfactor)。《中国药典》规定T应为0.95~1.05。T1.05为拖尾峰。宝山区赛默飞世尔液相色谱系统价格上海禹重实业有限公司致力于提供液相色谱系统,期待您的光临!
高效液相色谱法之实例:高效液相色谱法,只要求试样能制成溶液,而不需要其气化,因此不受试样挥发性的限制。对于高沸点、热稳定性差、相对分子量在400以上)的有机物(这些物质几乎占有机物总数的75%~80%)原则上都可以应用高效液相色谱法来进行分离、分析。据统计,在目前已知的化合物中,能用气相色谱分析的大约占20%,而能用液相色谱分析的大约占70~80%。液相色谱分析可以用于:1、环境中有机氯农药残留量分析;2、稠环芳烃的分析;3.阴离子分析。
高效液相色谱的历史1903年俄国植物化学家茨维特(Tswett)提出“色谱法”(Chromatography)和“色谱图”(Chromatogram)的概念。茨维特使用色谱法chromatography来描述他的彩色试验。1930年以后,相继出现了纸色谱、离子交换色谱和薄层色谱等液相色谱技术。1952年,英国学者Martin和Synge基于他们在分配色谱方面的研究工作,提出了关于气-液分配色谱的比较完整的理论和方法,把色谱技术向前推进了一大步,这是气相色谱在此后的十多年间发展十分迅速的原因。1958年,基于Moore和Stein的工作,离子交换色谱的仪器化导致了氨基酸分析仪的出现,这是近代液相色谱的一个重要尝试,但分离效率尚不理想。1960年中后期,气相色谱理论和实践发展,以及机械、光学、电子等技术上的进步,液相色谱又开始活跃。到60年代末期把高压泵和化学键合固定相用于液相色谱就出现了HPLC。1970年中期以后,微处理机技术用于液相色谱,进一步提高了仪器的自动化水平和分析精度。1990年以后,生物工程和生命科学在国际和国内的迅速发展,为高效液相色谱技术提出了更多、更新的分离、纯化、制备的课题,如人类基因组计划,蛋白质组学有HPLC作预分离等。液相色谱系统,就选上海禹重实业有限公司,让您满意,欢迎新老客户来电!
串联LC或LC-MS应用提析通量VanquishDuo系统很大程度地提高了质谱仪的利用率梯度分离通常用于LC或LC-MS。色谱柱清洗和重新平衡耗费时间长从而降低了总体样品通量。串联LC或LC-MS的VanquishDuo系统通过以下方式消除了这些限制并提高了分析效率:•在不更改验证方法的情况下增加了样品通量•通过尽可能地提高仪器利用率增加了投资回报•通过延伸的色谱柱清洗方法减少了色谱柱残留量,同时不影响通量•根据原始梯度方法自动进行串联方法转换,简化了双梯度方法设置上海禹重实业有限公司是一家专业提供液相色谱系统的公司,欢迎您的来电!宝山区赛默飞世尔液相色谱系统价格
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高效液相色谱分离原理液-液分配(Liquid-liquidPartitionChromatography)及化学键合相色谱(ChemicallyBondedPhaseChromatography) 流动相和固定相都是液体。流动相与固定相之间应互不相溶(极性不同,避免固定液流失),有一个明显的分界面。当试样进入色谱柱,溶质在两相间进行分配。达到平衡时,服从于高效液相色谱计算公式:式中,cs—溶质在固定相中浓度;cm—溶质在流动相中的浓度;Vs—固定相的体积;Vm—流动相的体积。LLPC与GPC有相似之处,即分离的顺序取决于K,K大的组分保留值大;但也有不同之处,GPC中,流动相对K影响不大,LLPC流动相对K影响较大。a.正相液-液分配色谱法(NormalPhaseliquidChromatography):流动相的极性小于固定液的极性。b.反相液-液分配色谱法(ReversePhaseliquidChromatography):流动相的极性大于固定液的极性。c.液-液分配色谱法的缺点:尽管流动相与固定相的极性要求完全不同,但固定液在流动相中仍有微量溶解;流动相通过色谱柱时的机械冲击力,会造成固定液流失。上世纪70年代末发展的化学键合固定相(见后),可克服上述缺点。宝山区赛默飞世尔液相色谱系统价格
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